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    WesternBlot的实验原理及主要特点是怎样的

    发布时间: 2021-11-22  点击次数: 32次
       WesternBlot蛋白质免疫检测的实验原理:
      WB是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
     
      与Southern或Northern杂交方法类似,但WB采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,「探针」是抗体,「显色」用标记的二抗。
     
      经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
     
      WesternBlot蛋白质免疫检测的特点:
      该仪器测定样品中蛋白质氮,真实反应样品中蛋白质的含量,不受三聚氰胺、尿素及甘氨酸等非蛋白氮的干扰。
     
      适用于实验室的快速定量检测,检测每个样品只需5~10分钟。
     
      克服了传统凯氏定氮法样品前处理系统繁琐,操作步骤繁杂等缺点,避免了传统方法需向样品中加入浓硫酸,高温消化等危险性步骤。
     
      操作步骤简单,对工作环境及操作人员无特殊要求,只需认真阅读说明书就可实现操作。
     
      被测样品采用流通引入方式,取代传统的样品池,方便用户操作、清洗及维护。
     
      具有测量、设置、记录、保存、打印和数据统计等功能。
     
      通过RS-232/USB接口和App可实现联机操作,实时对测量数据收集、分析。
     
      具有内置打印系统,可实现即时打印功能。
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